高压制备纽莫康定B0的中试研究(一) 纽莫C0分别为同分异构体

纽莫康定B0(Pneumocandin B0)是高压棘白菌素类化合物,其半合成衍生物卡泊芬净(Caspofungin)已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗无效或无法耐受其他抗真菌药的制备中试患者的侵袭性曲霉病。作为合成真菌药物卡泊芬净的纽莫中间体,纽莫康定B0由真菌Zalerion arboricola发酵产生,康定发酵过程中会产生与纽莫康定B0结构相近的研究副产物及大量的色素。按照结构中脯氨酸上取代基的高压不同主要分为A0,B0和C0,制备中试其中B0,纽莫C0分别为同分异构体。康定由于C0为B0生产过程中的研究关键杂质,在生产纯化过程中去除C0有一定的高压难度。因此,制备中试开发出一种有效的纽莫方法得到高纯度的纽莫康定B0对于后续合成卡泊芬净尤为重要。
色谱分离法在化合物的康定分离中应用较为广泛,且色谱纯度、研究回收率和分离效率等方面远远优于传统的制备方法,其中色谱纯度通过面积归一化法得到。相比于中低压色谱制备,高压色谱制备效率高、柱效高。笔者以实验室制得的纽莫康定B0粗品为原料,通过高压制备对纽莫康定B0进行了放大中试研究,开发出了一种生产周期短、成本低和色谱纯度高的制备工艺。
1 仪器与试药
1.1 仪 器
U3000高效液相色谱仪,赛默飞Thermo公司;Cs-prep150工业制备色谱系统,汉邦科技;R-1001N型旋转蒸发仪,郑州长城科工贸有限公司;SHB-B95型循环水式多用真空泵,郑州长城科工贸有限公司;DHJK-2020低温冷却循环泵,郑州科泰实验设备有限公司;SCIENTZ-12ND冷冻干燥机,宁波新芝生物科技股份有限公司。
1.2 试 药
工业级二氯甲烷,山东金岭化工股份有限公司;工业甲醇,兖矿国宏化工有限责任公司;改性硅胶,苏州纳微科技股份有限公司;纽莫康定B0粗品,鲁南新时代生物技术有限公司提供,质量分数81.20%;纽莫康定B0对照品,大同市矿区风华生物科技有限公司,质量分数95.56%,批号16001;纽莫康定C0对照品,大同市矿区风华生物科技有限公司赠与,质量分数95.11%,批号16002;乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为纯化水。
2 实 验
2.1 HPLC(高效液相色谱)法测定B0
纽莫康定B0检测方法:Thermo Hypersil GOLD C18,4.6 mm×250 mm, 5 μm; 以V(乙腈)∶V(水)=45∶55为流动相,等度洗脱;检测波长210 nm, 柱温40 ℃,进样量10 μL,流量1 mL/min, 运行时间45 min。以纽莫康定B0对照品进行外标法定量。纽莫康定B0对照品溶液的配制:取纽莫康定B0对照品约20 mg, 精密称定,置于50 mL容量瓶中,加乙醇超声溶解后,稀释至刻度,摇匀,制得质量浓度为400 mg/L的纽莫康定B0对照品溶液。供试品溶液配制:对制备液用氮气吹干,加乙醇振摇使溶解并稀释至质量浓度约1 000 mg/L,摇匀,用0.22 μm有机滤头过滤。纽莫康定B0的结构式为
2.2 HPLC(高效液相色谱)法测定C0
检测方法为公司自行开发,线性梯度洗脱程序如表1所示。Welch Ultimate HILIC Amide柱,4.6 mm×250 mm, 3.5 μm; 波长220 nm, 流量1.0 mL/min, 进样量10 μL,柱温40 ℃,流动相A为水,流动相B为乙腈。
以纽莫康定C0对照品进行外标法定量,纽莫康定C0对照品溶液的配制与纽莫康定B0对照品溶液的配制相同。纽莫康定C0的结构式为
声明:本文所用图片、文字来源《发酵科技》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系删除
相关链接:脯氨酸,卡泊芬净,二氯甲烷
相关文章
- 2025-05-11
- 中国消费者报深圳讯记者黄劼)网络交易平台上的商家信息公示要求有了规范,从8月1日起,深圳正式实施《网络交易经营者信息公示规范》。随着互联网技术的普及和数字经济的发展,我国网络交易市场规模持续扩大,对消2025-05-11
锚定现代化 改革再深化|福建厦门累计完成“一件事”套餐服务约30万件
中国消费者报福州讯李明伟记者张文章)为给企业和群众提供更加高效、便捷、优质的政务服务体验,福建省厦门市市场监管局累计推出17个“一件事”,融合81个行政审批事项,涵盖食品生产、食品经营、医疗器械经营、2025-05-11- 中国消费者报南宁讯庞悦记者顾艳伟)金风轻拂、稻香飘外,八桂大地万里稻田传递着丰收的喜悦。广西兴业县市场监管局以服务“三农”为切入点,赶在夏粮征收入库之时,组织计量检定人员到粮食收购企业及基层粮食管理所2025-05-11
- 今年,随着“两新”政策持续加力扩围,我州无缝衔接汽车、家电以旧换新,1月1日在全省率先启动手机等3C数码换新补贴活动,并接续启动汽车、家电、家居以旧换新活动,3月26日,又启动了电动自行车以旧换新活动2025-05-11
- 中国消费者报北京讯记者贾珺)记者7月2日从北京市市场监管局获悉,由北京市市场监管局制定的地方标准《大型活动可持续性评价指南》已提升为国家标准。该标准已于6月29日正式实施。据介绍,北京市市场监管局在服2025-05-11
最新评论